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             氨氮的測定（納氏試劑光度法）

原理：碘?汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，此顏色在較寬的波長范圍內(nèi)具有強(qiáng)烈吸收。通常測量用波長在410-425nm范圍。本法zui低檢出濃度為0.025mg/L。

儀器：紫外分光光度計、PH計、100ml具塞量筒。

試劑（配制試劑及水樣稀釋均用無氨水）

10%（m/v）硫酸鋅溶液：稱取10g硫酸鋅溶于水稀釋至100ml。

 25%氫氧化鈉溶液：稱取25g氫氧化鈉溶于水，稀釋至100ml，貯于聚乙烯瓶中。

  硫酸：ρ=1.84

  納氏試劑：

稱取16g氫氧化鈉，溶于50ml水中，充分冷卻至室溫。另取7g碘化鉀和10g碘?汞溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存。

 酒石酸鉀鈉溶液：

稱取50g酒石酸鉀鈉溶于100ml水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

銨標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取3.819g經(jīng)100℃干燥過的氯化銨溶于水中，移入1000mI容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，此溶液濃度為1000mg/L。

 無氨水制備：

每升蒸餾水中加0.1ml硫酸，在全玻璃餾器中重蒸餾，棄去50ml初餾液，接取其余餾出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

步驟：

 預(yù)處理：

取100ml水樣于具塞量筒中，加入1ml10%硫酸鋅溶液和0.1—0.2ml25%氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH至10.5左右，混勻。放置使沉淀，用經(jīng)無氨水充分洗滌過的中速濾紙過濾，并去初濾液20ml。

 校準(zhǔn)曲線的繪制：

移取1ml銨標(biāo)準(zhǔn)液于100ml容量瓶中,用水稀釋至標(biāo)線,此溶液為10mg/L分別吸取1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml銨標(biāo)準(zhǔn)液于100ml容量瓶中加水稀釋至標(biāo)線，其含量分別為0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L、1.0mg/L，然后分別取以上銨標(biāo)準(zhǔn)液50ml水樣于比色管中，加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，混勻，加1.5ml納氏試劑，混勻，放置10分鐘在波長420nm處，用光程10mm比色皿，經(jīng)水為參比，測量出吸光度，測完試樣后，紫外分光光度計會自動根據(jù)吸光度與氨氮的含量關(guān)系繪制曲線圖，并保存在紫外分光光度計內(nèi)（分光光度計的使用見6.15）。

 水樣的測定：

取1ml經(jīng)絮凝沉淀預(yù)處理后的水樣，加入比色管中，并加水稀釋至50ml，然后加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，混勻，加1.5ml納氏試劑，混勻，放置10分鐘后，同校準(zhǔn)曲線步驟測量，此時紫外分光光度計會根據(jù)校準(zhǔn)曲線顯示該水樣的氨氮含量，根據(jù)該含量乘以50，即得出被測水樣的總含量。

注意事項：

 納氏試劑中碘?汞與碘化鉀的比例，對顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉淀應(yīng)除去。

  濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無氨水洗滌。所用玻璃皿應(yīng)避免實驗室空氣中氨的沾污。