紫外-可見分光光度法,又稱紫外-可見吸收光譜法(ultraviolet and visible spectrum),是以紫外線-可見光區(qū)域(通常200-800 nm)電磁波連續(xù)光譜作為光源照射樣品,研究物質(zhì)分子對光吸收的相對強(qiáng)度的方法。物質(zhì)中的分子或基團(tuán),吸收了入射的紫外-可見光能量,電子間能級躍遷產(chǎn)生具有特征性的紫外-可見光譜,可用于確定化合物的結(jié)構(gòu)和表征化合物的性質(zhì)。紫外-可見吸收光譜在化學(xué)、材料、生物、醫(yī)學(xué)、食品、環(huán)境等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。
紫外可見分光光度計用途:
1、用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
2、紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,渦街流量計也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
3、紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。
4、單光束:適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。
5、雙光束:自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價格較高。