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使用紫外可見分光光度計如何獲得準(zhǔn)確的結(jié)果
更新時間:2018-03-05 點擊次數(shù):2747
   為了獲得準(zhǔn)確的研究結(jié)果,準(zhǔn)確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結(jié)果的不可靠性與偶然誤差和系統(tǒng)誤差有關(guān)。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數(shù)量測量的統(tǒng)計處理來減少;系統(tǒng)誤差影響測量結(jié)果的準(zhǔn)確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質(zhì)的準(zhǔn)確測量結(jié)果,使系統(tǒng)誤差統(tǒng)一起來。而紫外可見分光光度計的系統(tǒng)誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應(yīng)、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數(shù)、操作者的改變、使用物質(zhì)的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關(guān)于操作誤差,多數(shù)情況下,通過嚴(yán)格按操作程序測量、儀器調(diào)零、準(zhǔn)確稱量等來控制或減少這種誤差的產(chǎn)生。關(guān)于儀器的系統(tǒng)誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準(zhǔn)確度很高的測量,則必須天天校正。
  紫外可見分光光度計的校正方法
  小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能*吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現(xiàn)的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現(xiàn)的透射比可得出近似的雜散光百分?jǐn)?shù)。若所含雜散光大于0.1%,應(yīng)設(shè)法減低,或?qū)y得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當(dāng)?shù)臑V光片,該濾光片在測定波長范圍內(nèi)*透光,但吸收此范圍外的光波,由此來消除雜散光。

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